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CTAB抽提液中文说明书

更新时间:2020-05-08 点击次数:2301

CTAB抽提液

 

产品简介:
从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等,


CTAB抽提法是经典的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的

 

提取,获得的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。

CTAB抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),临用前加入

2-ME,使其更有效,更稳定。


产品组成:

编号
名称
NE0011
500ml
Storage
试剂(A):CTAB抽提液
500ml
RT
试剂(B):2-ME
10ml
RT避光
使用说明书


自备材料:
1、液氮\研钵或匀浆器
2、离心管
3、恒温箱或水浴锅
4、离心机
5、*/异戊醇(24:1)
6、75%乙醇

操作步骤(仅供参考):
1、取5ml适量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液:2-ME=50:1的比例混匀,置于15ml或其他规格的离心管中,60℃预热;如有必要可加入1~5μg/ml的RNaseA,以便去除残余的RNA。

2、称取1~1.5g或适量新鲜植物组织或叶片,用预冷的液氮或干冰冷却研钵或匀浆器,将新鲜植物组织或叶片粉碎成细粉末,将冷冻的组织转移至离心管中。

3、向粉碎后的组织中按4~5ml/g加入预热的CTAB抽提液,充分混匀,65℃温育15~60min,并不时混匀。

4、加入等体积*/异戊醇(24:1),颠倒充分混匀,8000g离心5~10min,回收上层水相(即上清液,该上清液中含有所需DNA)。

5、转移上清液至新的离心管中,加入1/2~2/3体积预冷的异丙醇,轻轻混匀,室温静置使核酸沉至管底;如果观察不到沉淀,可在室温下静置数小时至过夜。

6、2000g离心2min,轻轻弃上清液。


7、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇,室温静置20min,4000g离心10min,轻轻弃上清液。

8、自然干燥DNA,加入适量去离子水或TE缓冲液;如有必要可加入1~5μg/ml的RNAseA,以便去除残余的RNA,-20℃保存。

注意事项:
1、如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:24个月有效。

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