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冰冻切片软骨组织阿尔新蓝(alcian blue)染色试剂盒产品说明书

更新时间:2023-02-22 点击次数:688

MB80015.2 v.A

 

 冰冻切片软骨组织阿尔新蓝(alcian blue)染色试剂盒产品说明书(中文版)

 

主要用途

 

 冰冻切片软骨组织阿尔新蓝(alcian blue)染色试剂是一种旨在使用阳离子染料阿尔新蓝,使软骨组织上蛋白多糖聚糖染色,呈现深蓝色,来分析冰冻组织切片组织中软骨生成状况的而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻组织切片的细胞分化和软骨生成的检测。广泛用于软骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。

 

技术背景

 

间质干细胞(mesenchymal stem cell)分化产生脂肪细胞(adipocyte)、成骨细胞(osteoblast)、肌细胞(myocyte和软骨细胞(chondrocyte)。软骨细胞及其细胞外基质(extracellular matrix)构成软骨组织(cartilage tissue),其含有硫酸软骨素(chondroitin sulfate)和硫酸角质素(karatan sulfate)等为主要成分的蛋白多糖(proteoglycan)聚糖(aggrecan),成为软骨生成(chondrogenesis)的标记(indicator)。阿尔新蓝(alcian blue)是一种阳离子含铜染料,使酸性粘多糖(mucopolysaccharide类蛋白聚糖染色,呈现深蓝色。

 

产品内容

 

 清理液(Reagent A            毫升

 固着液(Reagent B            毫升

 染色液(Reagent C            毫升

 去色液(Reagent D            毫升

产品说明书               1

 

保存方式

 

保存在4℃冰箱里; 染色液(Reagent C),避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全。有效保证3

 

用户自备

 

小型染色缸:用于石蜡切片的蜡操作

光学显微镜:用于组织细胞染色后观察分析

 

实验步骤

 

一、 固着处理

1. 

2. 取出10片待测的冰冻组织切片

3. 小心加上xx微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

4. 室温下孵育5分钟

5. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

6. 小心加上xx微升 固着液(Reagent B,铺满整个样品表面

7. 室温下,孵育60分钟

8. 小心移去载玻片上的 固着液(Reagent B

9. 小心加上xx微升 清理液(Reagent A),清洗样品表面

10. 小心移去载玻片上的 清理液(Reagent A

11. 重复实验步骤910一次

二、样本染色处理

1. 小心加上xx微升 染色液(Reagent C,铺满整个片样品表面

2. 室温下孵育60分钟,避免光照

3. 小心移去片上的 染色液(Reagent C

4. 小心加xx微升 清理液(Reagent A

5. 室温下孵育2分钟

6. 小心 清理液(Reagent A

 

三、 (选择步骤)样本复染处理

 

1. 小心加上xx微升 去色液(Reagent D),覆盖整个片样品表面

2. 室温下孵育3分钟(注意:观察背景蓝色变化,避免过度褪色)

3. 小心 去色液(Reagent D

4. 小心加xx微升 清理液(Reagent A

5. 室温下孵育2分钟

6. 小心移去 清理液(Reagent A

7. (选择步骤)样本复染处理(核固红)

8. (选择步骤)样本透明处理和封片

9. 即刻在一般光学显微镜下观察:性细胞呈现深蓝,背景呈现浅蓝色调(如果复染:细胞质呈现粉红色,细胞核呈现红色)

注意事项

1. 本产品为50次操作

2. 操作时,须带手套

3. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全

4. 所有操作在室温下进行

5. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面

6. 样品色避免过度

7. 建议使用 核固红复染试剂盒(  40011),增强染色对比度

8. 组织细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 

9. 本公司提供系列软骨组织细胞染色试剂产品

 

质量标准

 

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定显色清晰

 

 

 


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