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植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法
时间:2021/3/10 点击次数:1634
植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过香豆酰辅酶 A 和丙二酰
辅酶 A 缩合反应系统中释放出巯基辅酶 A,使用 Ellman 试剂后,产生黄色 5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光
峰值的变化,即采用比色法来测定植物裂解样品中酶活性的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、
成功实验证明的。其适合于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、
上胚轴(epicotyl)等查尔酮合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
查尔酮合成酶(chalcone synthaseCHSEC2.3.1.74)是聚酮体合成酶(polyketide synthasePKS)大家属
中的一员,是启动类黄酮(flavonoid)化合物合成通路中*步关键酶,形成植物系统性获得性抗性
systematic acquired resistanceSAR)的基础。查尔酮合成酶存在于细菌、植物和真菌中。在所有裸子植
物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各种不同发育阶段中的不同组织中表达。查尔酮合成酶为
同源二聚体,分子量为404000Kd,由环境压力,包括UV照射、伤口、病原菌袭击等诱导,通过丙二酰
辅酶A脱羧基反应(decarboxylation)、与香豆酰辅酶缩合、聚酮体链延展(chain elongation)、中间产物环
状化(cyclization)和芳构化(aromatization)产生查尔酮,一种类黄酮化合物前体,作为化学信使,由此
生成各种后续继发性代谢化合物,参与抗病原微生物例如异黄酮植物保护素(isoflavonoid phytoalexin)、花
青素花色素化、抵御环境压力(UV光保护)、花粉育性(pollen fertility)、抗氧化、共生根系结瘤(symbiotic
root nodulation),以及作为抗生素、免疫抑制剂、抗肿瘤和抗真菌的药物作用。还在细菌的囊肿形成和阿米
巴细胞分化中产生作用。基于香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A,在敏感性抑制剂木犀草素(Luteolin)存在与
否的情况下,受到查尔酮合成酶的作用,缩合产生查尔酮,并释放出巯基辅酶ACoA-SH),进而与Ellman
试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-2-nitrobenzoic acid);DTNB]反应后,产生黄色的5-
-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acidTNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析
查尔酮合成酶的活性。查尔酮合成酶反应系统为:
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