MB50353.1 v.A
细胞逆转录酶（REVERSE TRANSCRIPTASE）活性荧光定量检测试剂盒
产品说明书（中文版）
主要用途
细胞逆转录酶（REVERSE TRANSCRIPTASE）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过双链分子底物，在dTTP的参与下，通过逆转录酶的催化，聚合产生RNA-DNA异源双链DNA分子，由PicoGreen特异染色，即采用荧光法来测定细胞裂解样品中酶活性的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解悬液样品（动物、人体、昆虫等）逆转录酶的活性，以及抑制剂检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景
逆转录酶（REVERSE TRANSCRIPTASE；EC2.7.7.49），又称为RNA依赖性DNA聚合酶（RNA-dependent DNA polymerase），是将单链RNA分子转录为双链DNA的DNA聚合酶，包括HIV逆转录酶、莫洛尼氏鼠白血病病毒（Moloney murine leukemia virus；MMLV）逆转录酶、禽类成髓细胞瘤病毒（avian myeloblastosis virus；AMV）逆转录酶、端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcriptase） 等。逆转录病毒使用逆转录酶达到逆转录RNA为DNA，然后整合到宿主基因组再复制。在真核生物中，端粒酶是一种逆转录酶。逆转录酶在分子生物学中得到广泛运用。检测逆转录酶活性成为病毒感染的监测手段，同时作为药物筛选的靶标。基于由poly-A模板与oligo-dT引物构成的双链分子底物，在dTTP的参与下，通过逆转录酶的催化，聚合产生RNA-DNA异源双链DNA分子（heteroduplexes），由PicoGreen特异染色，根据荧光强度分析（激发波长480nm，散发波长520nm），来定量测定逆转录酶的活性。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
裂解液（Reagent B） 毫升
缓冲液（Reagent C） 毫升
底物液（Reagent D） 微升
终止液（Reagent E） 微升
染色液（Reagent F） 微升
稀释液（Reagent G） 毫升
标准液（Reagent H） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存 清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里； 染色液（Reagent F）避免光照；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器
细胞刮脱棒：用于细胞脱离
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织
台式离心机：用于样品操作
比色皿或酶标板：用于荧光分析的容器
荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的 裂解液（Reagent B）置入冰槽里融化。然后进行下列操作。
