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如何降低ELISA试剂盒操作的布景噪音?

更新时间:2020-04-28 点击次数:1246
   在ELISA试剂盒操作中,咱们都认为ELISA试验的原理好像很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗刷和关闭。然而,即使是平淡无奇的洗刷和关闭,假如做得不太好,也有或许毁了整个试验。在试验结束时,咱们是否能获得有意义的信息,这在很大程度上取决于成果的信噪比。布景噪音会影响您对成果的判断。今天我司教你怎么降低ELISA试剂盒操作的布景噪音。
  一、洗刷很重要:洗刷步骤看似很无聊,其实很重要,因为假如未结合的资料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会添加布景噪音。如有必要,可添加洗刷液中的盐浓度,这会阻挠非特异结合反应。假如布景过高,而您置疑洗刷不够时,可以测验添加洗刷次数。
  二、关闭更关键:关闭液的作用是让不相关的蛋白占有微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也期望抗体只与目的蛋白结合吧。假如您的布景过高,ELISA试剂盒置疑关闭不充分,那么您可以测验运用更高浓度的关闭液,或适当延伸关闭时间。
  三、抗体浓度须优化:咱们通常会跟着师兄师姐留下来的操作步骤,但是假如试剂稍有不同,则或许需要优化抗体的量。记住,非特异的抗体结合会添加布景。为了避免这一点,切勿运用过多的一抗或二抗。
  四、检测试剂要适量:另一点也很清楚明了:切勿运用过多的检测试剂。假如浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高布景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。
  假如您的ELISA试剂盒操作中不幸地遇到了高布景,那么也无需太忧虑,顺次检查ELISA体系中的组分,并排除或许存在的问题。尽心优化,相信很快就会有美丽的成果。

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