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ELISA试剂盒实验中抗体效价的检测方法都有哪些?

时间:2021-09-24 点击次数:174
  ELISA试剂盒实验中抗体效价的检测方法,在ELISA试剂盒实验中,抗体的重要性关系到实验能否成功,但是大多时候很多同学都没有意识到,或者不知道怎么样评价抗体的质量,今天我们来了解一下有哪些方法可以检测抗体的质量,一般来说抗血清质量的评价主要通过一下几种方法
  放射免疫法:以不同稀释度的抗血清与优质符号抗原混合,孵育24h后,测定其结合率。一般以结合率为50%的血清稀度和为效价。如某抗血清的结合率为50%时的稀释度为1:15000,则该血清的效价就是1:15000。抗血清的效价,除由抗血清自身的性质决议外,还受符号抗原的质量、孵育时刻,所用稀释液的成分及其pH等要素的影响,在工作中有必要引起留意。
  ELISA试剂盒双向分散法:使用大分子抗原和抗体在琼脂平板上分散,两者在相交处发生沉积线,以调查和判别抗血清中是否有抗体及其浓度。
  球脂板的制备:100ml pH7.1 的磷酸盐缓冲液加到15g的琼脂内,于水浴中加温,搅拌,使琼脂彻底溶解,趁热用纱布过滤,待溶液冷却到65℃左右时,参加叠氮钠,使其在溶液中的浓度为0.1%。用移液管把琼脂放在洁净平皿或玻片上,约3mm厚,待其冷却,彻底凝固后,用打孔器打孔。中心孔内加适量抗原,周围各孔内分别参加50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀释的抗血清,37℃下孵育24h,调查有无沉积线发生,以判别血清的稀释度。

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