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如何避免elisa试剂盒实验的误差概率?

时间:2022-01-18 点击次数:308
  做实验出现误差在所难免,不过我们做好了相关事项的话还是可以降低这种概率的。那如何降低elisa试剂盒实验的误差概率呢?
  一、检验技师。应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。
  二、使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。
  三、仔细阅读说明书。严格按照说明书要求进行规范化操作。ELISA试剂盒不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进。
  四、洗涤干净。洗板不干净,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。
  五、严控反应时间。elisa试剂盒反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。
  六、注意ELISA试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。
  七、评估试剂的实用性。试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。
  八、严格掌握显色时间。显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。
  九、加样要准确、快速。如果加样不准确,酶生成物的量不能确定,elisa试剂盒直接影响显色结果。显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关,所以加样应慎重。

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