葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)
产品简介:
葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布zui广、zui重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,zui常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸,同时消耗溶液中的氧,产生过氧化氢,过氧化氢与氧化色原物质反应生成有色化合物,初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比,酶标仪进行比色测定。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定,但不宜直接检测尿液中的葡萄糖含量,其中Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
编号 名称 | MB0711200T | MB0711500T | Storage |
试剂(A): 酚试剂 | 30ml | 75ml | RT 避光 |
试剂(B): 酶试剂 | 磷酸盐缓冲液(pH7.0) | 30ml | 75ml | -20℃ 避光 |
4-氨基安替比林 |
葡萄糖氧化酶 |
过氧化物酶 |
临用前,按酚试剂:酶试剂=1:1混匀,即GOD-POD工作液,4℃保存。 |
试剂(C): Glu标准(5mmol/L) | 1ml | 1ml | -20℃ |
试剂(D): ddH2O | 1ml | 1ml | RT |
使用说明书 | 1份 |
自备材料:
生理盐水或PBS
96孔板或离心管、小试管
水浴锅或恒温箱
酶标仪或分光光度计
全自动或半自动生化分析仪
操作步骤(仅供参考):
1、 样本处理:
①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围(25mmol/L),用生理盐水稀释后检测。
②细胞样本:
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
b、用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心,待用。亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心,待用。
③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆。2500~3000g离心10min,取上清待用。
2、 普通分光光度计(2ml比色杯)Glu测定操作:
①按下表依次加入试剂:
| 空白管 | 标准管 | 待测管 |
ddH2O(μl) | 20 | | |
Glu标准(5mmol/L)(μl) | | 20 | |
待测样本(μl) | | | 20 |
GOD-POD工作液(ml) | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
②充分混匀, 37℃水浴中孵育15min。
③分光光度计测定505nm波长处吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
3、 分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪Glu测定操作:。