植物可溶性糖含量试剂盒说明(微量法)
货号：MB0035
规格: 100 管/96 样
产品简介：
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖是指样品中的还原
单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。
检测原理为蒽酮比色法。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定，具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微
量样品的测定等优点。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、浓硫酸、研钵和蒸馏水。
产品内容：
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃避光保存；
试剂二：10ml×1 瓶，4℃保存；
操作步骤：
一、样品中可溶性糖的提取：
称取约0.1～0.2g 样本，加入1ml 蒸馏水研磨成匀浆，倒入有盖离心管中，沸水浴10 min（盖紧，以防止水
分散失），冷却后，8000g，常温离心10min，取上清液于10ml 试管中，用蒸馏水定容至10ml，摇匀备用。
二、测定步骤：
1. 分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至620nm，蒸馏水调零。
2. 调节水浴锅至95℃。
3. 工作液的配制：在试剂一中加入2.5 ml 试剂二。充分溶解后使用，如难溶解，可加热搅拌(用不完的试剂可4℃
保存一周)。
4. 加样表（在EP 管中反应)：
| 试剂（ul） | 空白管 | 测定管 |
| 样本 | | 40 |
| 蒸馏水 | 80 | 40 |
| 工作液 | 20 | 20 |
| 浓硫酸 | 200 | 200 |
混匀，置95℃水浴中10min（盖紧，以防止水分散失），冷却至室温后，取200μl 转移至微量石英比色皿或96
孔板中，于620nm 处，分别读取空白管和测定管吸光值，ΔA=A 测定管-A 空白管。
注意：
1. 空白管只要做一管。
2. 如果ΔA 大于1，需要将样本用蒸馏水稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。
3. 由于浓硫酸具有强腐蚀性，请谨慎操作。
可溶性糖含量计算：
A． 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、 标准条件下测定的回归方程为y =8.55x - 0.07；x 为标准品浓度（mg/ ml），y 为吸光值。
2、 按样本鲜重计算
可溶性糖（mg /g 鲜重）=〔(ΔA＋0.07 ) ÷8.55×V1〕÷（W×V1÷V2）＝1.17 ×(ΔA＋0.07 ) ÷W
3、 按样本蛋白浓度计算：
可溶性糖（mg / mg prot）= 〔(ΔA＋0.07 ) ÷8.55×V1〕÷（V1×Cpr）＝0.117 ×(ΔA＋0.07 ) ÷Cpr
V1：加入样本体积，0.04ml；V2：加入提取液体积，10ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g。
B． 用96 孔板测定的计算公式如下
1、 标准条件下测定的回归方程为y =4.275x - 0.07；x 为标准品浓度（mg/ ml），y 为吸光值。
2、 按样本鲜重计算
可溶性糖（mg /g 鲜重）=〔(ΔA＋0.07 ) ÷4.275×V1〕÷（W×V1÷V2）＝2.34 ×(ΔA＋0.07 ) ÷W
3、 按样本蛋白浓度计算：
可溶性糖（mg / mg prot）=〔(ΔA＋0.07 ) ÷4.275×V1〕÷（V1×Cpr）＝0.234 ×(ΔA＋0.07 ) ÷Cpr
V1：加入样本体积，0.04ml；V2：加入提取液体积，10ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g。
