植物组织钙离子含量测定的试剂盒 中文版说明书

植物组织钙离子含量测定的试剂盒

(货号：MB-0028-2    微板法)

一、测定原理：

样本中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝（MTB）结合，生成蓝色络合物；通过比色与同样处理的钙标准进行比较，可计算出样本中钙的含量。

二、试剂盒组成：(96T)

三、样本要求：

1、按常规检验要求采集处理样本, 样本可以是血清、血浆、组织匀浆及细胞、培养上清。

2、样本2～8℃可稳定3～4天,-20℃以下可稳定数月。

四、测定步骤：

（一）、血清（浆）操作步骤:

1、操作表：

混匀，静置5分钟后，波长610nm，酶标仪比色，测各孔OD值。

注:实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值,以保证实验的度。

2、计算公式：

（二）、组织或细胞匀浆的操作：

1、前处理:

准确称取组织重量按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的去离子水，冰水浴匀浆，2500转/分，离心10分钟，取10%的匀浆上清液待测。

2、操作表：

混匀，静置5分钟后，波长610nm，酶标仪比色，测各孔OD值。

注: 实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值,以保证实验的度。

3、计算公式：  

注：*gprot/L为克蛋白/升

五、技术参数：

六、注意事项：

1、实验应避免钙污染,建议*用一次性96孔板操作(本所有售)。

2、严重溶血、黄疸或脂血对结果有影响。

3、制备组织匀浆时，应选用去离子水作为匀浆介质,避免钙污染。

4、本试剂盒可上全自动/半自动生化分析仪

5、测定组织或细胞中钙离子含量，推荐同时测定总蛋白浓度（本所有售总蛋白定量试剂盒A045-1总蛋白试剂盒（双缩脲）、A045-2总蛋白试剂盒（考马斯亮蓝）、A045-3总蛋白试剂盒（BCA法））

6、本试剂盒仅用于科研。

附录Ⅰ：钙标准曲线的制备

1、前处理：

用去离子水将2.5mmol/L钙标准液稀释成不同的浓度：0.0625mmol/L、0.125 mmol/L、0.25mmol/L、0.5mmol/L、0.625mmol/L、1mmol/L、2mmol/L。

2、操作表：

混匀，静置5分钟后，波长610nm，酶标仪比色，测各孔OD值。

注: 实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值,以保证实验的度。

3、测定结果：

4、绘图如下:

附录Ⅱ：血清（浆）样本钙测定

1、操作表：

混匀，静置5分钟后，波长610nm，酶标仪比色，测各孔OD值。

注: 实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值,以保证实验的度

2、计算公式：  

   3、计算举例：

例1：大鼠血清（浆）样本用去离子水2.5倍稀释后取样10µl ，按说明书操作测得：空白孔OD值：0.2428，标准孔OD值：0.3918，测定孔OD值：0.3699，则计算结果为：

例2：犬血清（浆）样本用去离子水2.5倍稀释后取样10µl ，按说明书操作测得：空白孔OD值：0.2428，标准孔OD值：0.3918，测定孔OD值：0.3902，则计算结果为：

例3：细胞上清样本用去离子水2.5倍稀释后取样10µl ，按说明书操作测得：空白孔OD值：0.2428，标准孔OD值：0.3918，测定孔OD值：0.3639，则计算结果为：

附录Ⅲ：组织样本钙测定

1、前处理:

准确称取组织重量按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的去离子水，冰水浴匀浆，2500转/分，离心10分钟，取10%的匀浆上清液待测。

2、操作步骤：

混匀，静置5分钟后，波长610nm，酶标仪比色，测各孔OD值。

注: 实验前可先将96孔板用酶标仪读取并记录空板OD值,以保证实验的度。

3、计算公式：

注：*gprot/L为克蛋白/升

4、计算举例：

取10%的大鼠脑组织上清液10µl ，按说明书操作测得：空白孔OD值：0.2428，标准孔OD值：0.3918，测定孔OD值：0.2689，并测得10%大鼠脑组织蛋白浓度为3.8475gprot/L,则计算结果为：