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荧光定量检测试剂盒在特殊领域的应用推广

更新时间:2015-11-23 点击次数:1522
     荧光定量检测试剂盒在特殊领域的应用推广
  荧光定量检测试剂盒用于检测未知抗原的双抗体夹心法。荧光定量检测试剂盒应用亲和素和生物素的ELISA试剂盒,亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的荧光定量检测试剂盒。生物素又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,荧光定量检测试剂盒可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素医学教育网整理化的产物。
     荧光定量检测试剂盒报价也是相当的低。用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。荧光定量检测试剂盒在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每 次3分钟。加样:往荧光定量检测试剂盒加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然 后洗涤。加酶标抗体:荧光定量检测试剂盒于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37 ℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。结果判定:可于白色背景上,荧光定量检测试剂盒可直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强 ,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在 ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大 于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
     以上特性来看,针对购买荧光定量检测试剂盒报价合情合理,亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个 生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。荧光定量检测试剂盒具有性、灵敏性、特异性、重复性和可靠性等特点,主要用于科研和定量检测细胞液、体液 、组织、血清、血浆等标本中猪内皮素1(ET-1)含量。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤 标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响。荧光定量检测试剂盒的细胞培养上清:荧光定量检测试剂盒检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左 右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬 液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,荧光定量检测试剂盒以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟 左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
 

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