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细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)活性比色法定量检测
时间:2015/11/30 点击次数:1947

主要用途

 

 细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂的水解,释放黄色对硝基苯胺,产生吸光峰值的变化,即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的其适用于各种细胞裂解萃取液样品(动物、人体等)尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

 

尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂urokinase-type Plasminogen Activator;uPA;EC3.4.21.73),又称为尿激酶(urokinase;UK,属于丝氨酸蛋白酶,存在于血液、细胞外基质和尿液中。尿激酶由411氨基酸构成,分子量为54KD,有3个结构域:丝氨酸蛋白酶结构域、kringle结构域和生长因子结构域。其主要的生理性底物为纤维蛋白溶酶原Plasminogen),即纤维蛋白溶酶(plasmin)的酶原形式(zymogen),切离部位为Cys-Pro-Gly-ArgVal -Val-Gly-Gly-Cys。一旦切离后激活,纤维蛋白溶酶参与细胞蛋白水解过程,包括血栓溶解thrombolysis)和细胞外基质降解等。uPA与组织重构、修复、血管形成(angiogenesis)性疾病和肿瘤扩散有关。uPA的抑制剂是丝氨酸蛋白酶抑制剂serpins),即纤维蛋白溶酶原激活剂抑制剂Plasminogen Activator Inhibitor;PAI)。基于人工合成的肽化合物底物p-EGR-pNA(pyro-Glu-Gly-Arg-pNitroaniline焦谷氨酸甘氨氨酰对硝基苯胺)受到尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂的水解,释放有色对硝基苯胺,在分光光度仪405nm 波长)下,测定吸光峰值的变化,来定量测定尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂的活性。反应系统为:

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