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纯化线粒体磷氧比(ADP/O)定量检测试剂盒产品
时间:2015/12/22 点击次数:1751

主要用途
纯化线粒体磷氧比(ADP/O)定量检测试剂是一种旨在通过极谱法检测系统(polarographic system)测定新鲜活体线粒体在已知浓度ADP存在(III态呼吸)的情况下氧浓度的降低,来分析磷氧比(P:O ratio),以评价线粒体呼吸链和氧化磷酸化偶联程度,即能量转化效率的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于线粒体生理功能和药物作用机制等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。
技术背景
线粒体是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心。电子传递和ATP合成通过质子梯度偶联成一体,即线粒体的呼吸耗氧偶联着ADP与Pi合成ATP的磷酸化反应。线粒体每吸收一克原子氧的同时,生长ATP(ADP磷酸化)的克分子数的比值,为ADP/O值。线粒体的磷氧比直接表征线粒体呼吸耗氧和ATP合成的关系。正常线粒体的ADP/O(P/O)为1.5:磷氧比降低意味着线粒体解偶联;磷氧比增高意味着线粒体偶联良好。其zui大值为3.3。
产品内容
介质液(Reagent A) xx毫升
底物液(Reagent C) xx微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
CLARK氧电极仪:用于测定溶解氧浓度
实验步骤
实验开始前,制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用;同时将-20℃冰箱里的试剂融化,并预热氧电极仪到25℃。然后进行下列操作。
1. 加入xx毫升介质液(Reagent A)到反应玻璃槽
2. 使用微型磁力子搅拌,充分混匀
3. 密封反应槽
4. 开始记录氧浓度:起始饱和氧浓度值为0.240微摩尔分子氧/毫升(25℃)
5. 持续记录1分钟后,注射加入20微升待测的线粒体(总量2毫克)(注意:氧浓度可能瞬时增加5%)

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